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ELISA实验概念与原理

发表时间:2020-09-23 17:55

ELISA原理



酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)于1971年分别由瑞典学者和荷兰学者报道,开创了运用酶标记免疫技术,进行液体标本中微量物质测定的实验方法。




ELISA基本原理是把抗原或抗体在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面,测定时,将受检样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物,经洗涤去除反应液中其他物质,加入酶反应底物后,在酶的催化下变为有色物质,最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中被测物质量。




ELISA方法具有高度敏感性和特异性,易于自动化,应用非常广泛,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可使用,ELISA质量保证是一个复杂的过程,许多重要环节都影响到检测结果。大分子物质常用的测定模式有:双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM捕获法等,小分子物质常用竞争法,竞争法由于存在游离抗原和酶标抗原在操作时差、免疫亲和力、结构改变等方面的差异,影响因素更多,更加难于控制。




目前免疫学方法在环境监测、食品安全、药物监测、激素监测等领域,获得长足发展,大量的竞争法ELISA试剂盒被开发,质量控制越来越严格。




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